DNA-Cloning

Eine weitere Möglichkeit DNA zu kopieren, besteht darin, das zu kopierende DNA-Molekül (Insert)  in das Genom eines Organismus (Host oder Vektor)    einzuschleusen. Der Organismus vermehrt sich, d.h., die Zellen mit dem eingeschleusten DNA-Molekül teilen sich und es entstehen Kopien des Moleküls. Die Zellen werden dann getötet und die Kopien des Moleküls werden extrahiert.

Die bekanntesten Vektoren sind Plasmide, Cosmide, Phagen und YACs.       Plasmide sind ringförmige DNA-Moleküle, die in Bakterien vorkommen. In diese DNA-Moleküle kann man maximal 15kbp-lange DNA-Sequenzen einführen. Phagen sind Viren, deren Wirt das Bakterium E. Coli  ist. Sie können bis zu 25kbp-lange Fremdsequenzen mit Hilfe von Wirtszellen vermehren. Cosmide sind Phagen, bei denen die eigentliche Pagen-DNA durch die zu kopierende Sequenz ersetzt wird. Von der ursprünglichen Phagen-DNA bleiben nur noch einige für die Vermehrung notwendige DNA-Sequenzen übrig. YAC steht für Yeast-Artificial-Chromosome. Bei diesem Verfahren synthetisiert man ein künstliches Chromosom, das dem Genom der Hefe hinzugefügt wird. Das künstliche Chromosom besteht aus Steuersequenzen für die Zellteilung und dem zu kopierenden DNA-Molekül, das bis zu 1000000 Basenpaare lang sein kann.